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產品名稱:

Triton-NH4OH細胞裂解液

 
產品編號: PR0124819 
供應商: 遠慕生化試劑廠家 
儲存方式: 4℃ 
保質期: 12個月 
用途: 裂解緩沖液 
Triton-NH4OH細胞裂解液
Triton-NH4OH細胞裂解液的使用方法,注意事項,簡介,信息說明等詳情由上海遠慕生化試劑廠家提供詳細介紹,本司供應的裂解液產品非常多,主要有:RIPA裂解液(中),RIPA裂解液(強),RIPA裂解液(弱),NP-40裂解液,SDS裂解液,Triton X-100細胞裂解液,Triton-SDS細胞裂解液,Western及IP細胞裂解液(無抑制劑)及其他類,本司所供應的裂解液品種齊全,價格實惠,歡迎訂購!
 
【Triton-NH4OH細胞裂解液】使用方法_注意事項_自備材料_簡介
【Triton-NH4OH細胞裂解液】自備材料_簡介信息

【信息說明】

產品名稱:Triton-NH4OH細胞裂解液

規格:100ml/500ml

供應商:遠慕生化試劑廠家

分類:細胞組分分離

儲存條件:4℃,12個月

用途:裂解緩沖液

主要成分:無菌溶液。主要由0.5% Triton X-100、20mM NH4OH、PBS組成。


【自備材料】

1、胰蛋白酶

2、離心機

3、PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液

4、胎牛血清


【使用方法】

A、組織細胞樣本的常規操作

1、制備細胞懸液: 新鮮組織經過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理,通過適當方法制備成細胞懸液,離心棄上清。

2、裂解:加入3~5倍細胞沉淀體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer,輕柔吹打混勻,裂解。本操作步驟在4℃條件下操作更佳,亦可在室溫下操作。

3、離心: 4℃,離心5min,棄紅色上清。如無低溫離心機,本步驟亦可在室溫下操作。

4、如果發現紅細胞裂解不完全,可以重復上述步驟2和步驟3各一次。

5、洗滌:根據實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液,輕柔混勻重懸沉淀。4℃,離心2~3min,棄上清,該離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液的量一般應大于細胞沉淀體積的5倍以上。

6、如有必要,重復上述步驟5一次,共洗滌1~2次。

7、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀,進行計數、培養等后續實驗。

B、血液樣本的常規操作

1、取新鮮抗凝血,離心5min,棄上清。

2、 裂解:加入6~10倍細胞沉淀體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer,輕柔吹打混勻,裂解。本操作步驟在4℃條件下操作更佳,亦可在室溫下操作。

3、離心:4℃,400~500g離心5min,棄紅色上清。如無低溫離心機,本步驟亦可在室溫下操作。

4、如果發現紅細胞裂解不完全,可以重復上述步驟2和步驟3一次。

5、洗滌: 根據實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液,輕柔混勻重懸沉淀。4℃,離心2~3min,棄上清,該離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液的量一般應大于細胞沉淀體積的5倍以上。

6、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀,進行計數、培養等后續實驗。

注意: 對于微量或少量的血液樣本,可以不用第1步操作,可直接加入10倍血液體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer進行第2步操作,并在4℃或室溫裂解4~15min。

【Triton-NH4OH細胞裂解液】使用方法_注意事項
Triton-NH4OH細胞裂解液


【注意事項】

1、制備細胞懸液時應根據實驗需要,不一定要制備成單細胞懸液。

2、后續試驗如果是用于細胞培養,操作過程中應注意無菌操作,盡量在超凈工作臺內操作。

3、離心步驟盡量在4℃離心機上操作。

4、常規步驟與快速步驟的區別在于:常規步驟多了一步洗滌過程的離心,可以節省洗滌液的用量,并且洗滌效果也更好,不需要大體積的離心管;快速步驟少了一次離心過程,洗滌效果略差一些,同時需要大體積的離心管。

5、離心洗滌后,通常極微量的紅細胞不會影響后續的檢測。

6、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


【簡介說明】

在生物科研領域,經常需要去除紅細胞,去除紅細胞的方法有多種,如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化銨紅細胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。Leagene Triton-NH4OH細胞裂解液(Triton-NH4OH Lysis Buffer)經過優化配方,在裂解無核紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞(Lymphocyte)或其它有細胞核的細胞。本裂解液經過濾除菌,經過Triton-NH4OH Lysis Buffer處理過的血液或組織細胞樣品可以用于后續的細胞培養、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規的分析和檢測。

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標簽:Triton-NH4OH細胞裂解液


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