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偶氮熒光桃紅染色液實驗步驟

2021-09-07 13:55 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
中文名稱: 偶氮熒光桃紅染色液
規格:50ml
分類:結締染色
儲存方式:4℃,避光,12個月
用途:肌纖維染色,可區分肌纖維和膠原纖維
注意事項:肌纖維和肌上皮細胞呈玫瑰紅色,膠原纖維呈黃色。

簡介:肌纖維(Musclefiber)屬于肌組織成分,由肌細胞組成。根據形態和功能特點,肌纖維可以分為平滑肌(又稱橫紋肌)、骨骼肌、心肌。肌纖維染色的方法有很多種,如麗春紅法、苯胺藍法、鎢磷鎢酸蘇木素法等。鞣酸-偶氮熒光桃紅法是利用兩種酸性染料先后作用而完成鑒別染色。肌纖維染色液(Puchtler鞣酸偶氮熒光桃紅法)其染色原理在于鞣酸容易進入滲透性強的膠原纖維,膠原纖維呈黃色;偶氮熒光桃紅容易進入滲透性較低的肌纖維,肌纖維呈紅色。偶氮熒光桃紅染色液用于區分肌纖維和膠原纖維,對比清晰,不宜褪色,同時可以顯示肌上皮細胞,可用于乳腺和皮膚等肌上皮細胞瘤的診斷。

操作步驟(僅供參考):
1、常規組織固定于Bouin固定液(Carnoy固定液或中性福爾馬林亦可)。
2、直接轉入95%的乙醇中,常規脫水包埋。
3、石蠟切片厚4μm,常規脫蠟至水。
4、流水沖洗1min。
5、磷鉬酸分化液處理。
6、入偶氮熒光桃紅染色液浸染。
7、酸性醇分化液分化。
8、無水乙醇反復脫水多次。
9、常規脫水透明,中性樹膠封固。

注意事項:
1)在實驗后,請注意回收稀釋的抗體,回收的抗體在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。
2)稀釋后的抗體,包括已經使用過的稀釋抗體,4℃保存,回收后重復使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。
3)如果在重復使用過程中發現抗體出現輕微混濁現象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續檢測。
4)如果回收的抗體出現明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
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