<ruby id="lnzp1"><dl id="lnzp1"></dl></ruby>
<span id="lnzp1"></span>
<strike id="lnzp1"><dl id="lnzp1"></dl></strike>
<strike id="lnzp1"><dl id="lnzp1"></dl></strike>
<strike id="lnzp1"></strike>
<span id="lnzp1"><dl id="lnzp1"></dl></span>
<span id="lnzp1"></span>
<span id="lnzp1"><video id="lnzp1"><strike id="lnzp1"></strike></video></span>
<strike id="lnzp1"></strike>
<span id="lnzp1"></span>
<strike id="lnzp1"><video id="lnzp1"></video></strike>
<strike id="lnzp1"></strike>
<th id="lnzp1"><video id="lnzp1"></video></th>
<span id="lnzp1"></span>
<span id="lnzp1"><i id="lnzp1"><del id="lnzp1"></del></i></span>
<ruby id="lnzp1"><dl id="lnzp1"></dl></ruby>
<strike id="lnzp1"><dl id="lnzp1"></dl></strike>
<strike id="lnzp1"></strike><span id="lnzp1"></span>
歡迎來到上海遠慕生物科技有限公司官方網站!
021-50760790

影響重組蛋白純化的因素有哪些?

2021-09-07 10:28 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
隨著分子生物學技術的發展,以蛋白質的結構和功能為基礎來認識生命現象,已經成為當代生物醫藥研發的關注點之一。為了研究蛋白質,首先需要進行蛋白分離和重組蛋白純化,來得到高度純化并且具有生物活性的蛋白質。由于每一種蛋白的性質都有不同,所以沒有一種通用的蛋白純化方法,但是總的來說,一般影響重組蛋白純化的因素主要有以下幾種:

1、蛋白的屬性

在進行重組蛋白純化時,需要盡可能多的了解蛋白的屬性。如蛋白的化學性質,是否容易被蛋白酶降解,是否會和一些金屬離子、化學成分發生反應。蛋白的物理性質,是否對溫度敏感等。還有目的蛋白表達的定位,目的蛋白表達在胞內、細胞內膜、周質空間還是胞外等。

2、細胞內形成的區域與形式

細胞內區域化指的是模型細胞器對細胞的分割作用。內膜系統在細胞內形成一個個彼此隔離、相互獨立的功能性結構區域,稱為細胞內房室化或區域化。細胞內區域化可以擴大細胞內的表面積,為提高細胞代謝功能奠定基礎,還可以形成細胞內不同的特殊微環境,有效提高了細胞新陳代謝的質量和效率。細胞內區域化還形成了一個嚴密而完善的細胞內體系。遠慕生物可提供蛋白純化服務!

3、蛋白表達系統的選擇

一般來說蛋白表達的量依賴于所選擇的蛋白表達系統。如對宿主細胞具有毒性,需要選擇抗毒性的表達系統。而且不同表達系統,如大腸桿菌表達系統、酵母表達系統、CHO細胞表達系統等和培養方法都顯著影響下游的處理過程。

4、菌株的背景

在重組蛋白純化的研究中,尤其是大腸桿菌表達純化時,需要注意宿主菌的選擇。多數人會直接選擇自己實驗室曾經用過的表達菌株,或者是載體配套的菌株,而不去追究原因,即使表達結果不佳,大多在表達條件和載體上找原因,也不會考究菌株的選擇是否適合。菌株的背景很重要,如菌株內源的蛋白酶過多,可能會造成外源表達產物的不穩定,所以一些蛋白酶缺陷型菌株往往成為理想的起始表達菌株。在決定是否使用何種菌株時,還需要注意不同菌株有時已經攜帶某個質?;蛘咭呀浘哂心撤N抗生素抗性,要注意自己的表達質粒是否能與之兼容。

而且為了得到正確折疊的目的蛋白,在誘導方式的選擇上,需要考慮表達菌株的一些情況。如表達菌種的生長情況,菌種是否健壯、是否是單克隆菌種、菌體的濃度是否適合誘導。生長狀態不好的表達菌,一方面會造成目的蛋白的錯誤折疊,造成蛋白大小、形態等發生改變,另一方面會因為IPTG的加入,導致菌體死亡或者降解。

5、表達蛋白的應用

蛋白表達、分離、純化可以探索和研究基因的功能以及基因表達調控的機理、供作結構與功能的研究和作為催化劑、營養劑等。選擇表達載體時,要根據所表達蛋白的最終應用考慮。如為方便純化,可選擇融合表達;如為獲得天然蛋白,可選擇非融合表達。

培養條件的選擇也很重要,在實際的操作中,需要根據實際情況先小量摸索蛋白純化條件,待最佳條件確定,可以按照比例放大來純化目的蛋白。
收縮
QQ咨詢
  • 標準品
電話咨詢
  • 銷售一:18321664727
  • 銷售二:13310162040
  • 銷售三:18001933641
郵箱咨詢
  • [email protected]
少妇深喉口爆吞精视频无码_免费国产亚洲视频在线播放_老少配老妇老熟女中文普通话_在线观看国产午夜福利片汤唯