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改良Van Gieson染色液操作步驟

2021-08-31 14:10 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:改良Van Gieson染色液
英文名稱:Modified Van Gieson Ponceau S stain
儲存條件:4℃,避光,12個月
單位:瓶
規格:4×50ml

產品概述:膠原纖維(Collagen Fiber)是結締組織中分布最廣含量最多的一種纖維,廣泛分布于各種臟器,其中皮膚、鞏膜、肌腱最豐富。Van Gieson膠原纖維染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關。分子的大小由分子量來體現,小分子量易穿透結構致密、滲透性低的組織,而大分子量則只能迚入結構疏松的、滲透性高的組織。PA分子量小,麗春紅和復紅次之,淡綠分子量最大。VG染色后,肌纖維呈黃色,膠原纖維呈紅色。

改良Van Gieson染色液采用天青石藍和Mayer蘇木素染細胞核,使染色效果更好,保存時間液較長。麗春紅染色采用麗春紅S,不易褪色。常用于區分膠原纖維和肌纖維,可區分是膠原纖維源性腫瘤還是肌源性腫瘤,觀察組織或器官的損傷、修復與纖維化程度。

使用方法
1、組織固定于10%福爾馬林固定液中,常規脫水包埋。
2、切片厚4~5μm,常規脫蠟至水。
3、VG天青石藍染色液滴染2~3min。
4、稍水洗。
5、Mayer蘇木素染色液滴染2~3min。
6、稍水洗。
7、酸性乙醇分化液分化1~2s。
8、流水沖洗10min。
9、用配制好的改良VG染液滴染1~2min。
10、急速用水洗一下,即用95%乙醇快速分化脫水。
11、無水乙醇脫水3次,每次5~10s。
12、二甲苯透明3次,每次1~2min。中性樹膠封固。

染色結果
膠原纖維  鮮紅色
肌纖維、胞質及紅細胞  黃色
細胞核    藍褐色

注意事項
1、酸性乙醇分化液常規是1~2s,在分化完畢和流水沖洗后,應在顯微鏡下作觀察。如細胞核染色過深,可再分化0.5~1s。如過淡,可再染VG天青石藍液和Mayer蘇木精液1次,然后再經酸性乙醇分化。
2、改良VG染液分為D1、D2,臨用時按所需要的比例(1:9)混合,如染膠原含量少的組織,可按1:7混合。
3、經改良VG染色后,水洗或95%的乙醇洗時都要迅速,避免把麗春紅S和PA洗掉。
4、改良VG液染色后,可不經水洗,直接滴入95%的乙醇分化,然后經無水乙醇迅速脫水,這樣兩者的色澤較鮮麗。但有時會出現分化不均勻,故可急速用水洗一下后再用95%的乙醇分化。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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