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TAE緩沖液與TBE緩沖液的作用區別

2016-07-03 23:14 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
驗中常用的電泳緩沖液主要有三種:TAE、TBE和TPE。TBE與TPE緩沖容量高,DNA分離效果好,但TPE會導致DNA片段回收時含磷酸鹽濃度高,容易使DNA沉淀。TAE緩沖容量低,但價格較便宜,TBE緩沖液含有的EDTA可螯合二價陽離子,可抑制DNase活性,防止PCR擴增產物降解

TAE緩沖液的特點

TAE是使用最廣泛的緩沖系統。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質量(TBE中電泳時測出的相對分子質量會大于實際分子質量),且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%,電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果,此外,回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統進行電泳。TAE的缺點是緩沖容量小,長時間電泳不可選用,除非有循環裝置使兩極的緩沖液得到交換。

TBE緩沖液的特點

TBE 緩沖液也是常用的核酸電泳緩沖鹽溶液,主要用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳。TBE的主要成分是Tris-硼酸鹽與EDTA,緩沖能力強,適合較長時間電泳,分辨率較高,電泳小于1kb的片段時分離效果好。TBE 緩沖液中的硼酸成分會影響DNA回收效率以及后續的酶反應,TBE用于瓊脂糖凝膠時易造成高電滲作用,并且因與瓊脂糖相互作用生成非共價結合的四羥基硼酸鹽復合物而使DNA片段的回收率降低,所以不宜在回收電泳中使用。若要進行DNA片段的瓊脂糖凝膠電泳回收實驗,建議使用TAE 緩沖液。

上海遠慕生物科技有限公司自產產品5×TBE緩沖液和50×TAE 緩沖液,貨號分別為T1050和T1060,5×TBE緩沖液為5×濃縮液,工作濃度為0.5×,可直接用蒸餾水稀釋10倍后使用。50×TAE 緩沖液為 50×濃縮液,工作濃度為 1×,可直接用蒸餾水稀釋 50 倍后使用。若產品出現沉淀析出,請置于 37℃水浴使其溶解,不影響使用及實驗效果。
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